Pre absolvovanie predmetu je nutná 100% aktívna účasť a vypracovanie laboratórnych protokolov. Predmet sa končí písomnou skúškou.

Absolventi predmetu sa oboznámia s mechanizmami vírusovej infekcie a vyšetrovacími metódami využívanými vo virologickej diagnostike.

• Prehľad o pôvodcoch vírusových chorôb u rôznych druhov zvierat so zreteľom na významné vírusové infekcie zvierat a zoonózy.

• Charakteristika patogenetických mechanizmov vírusovej infekcie (perzistentné vírusové infekcie, vírusom indukovaná imunosupresia, onkogenéza).

• Mechanizmus pôsobenia virostatík.

• Najnovšie metódy na vyšetrenie vzoriek v zameraní na pravdepodobného pôvodcu na antigénnej a genetickej úrovni.

Osnova prednášok (2 hod.)

1. História, prítomnosť a budúcnosť virológie. Patogenéza vírusovej infekcie - virulencia a patogenicita, interakcia vírusov s hostiteľskými bunkami, priebeh infekcie a klinické prejavy.

2. Antivírusová imunita. Všeobecné faktory rezistencie. Bunkové receptory a cytokíny v boji proti vírusovej infekcii. Vyhýbanie sa imunitnej odpovedi.

3. Antivirotiká.

4. Onkogenéza a onkogénne vírusy. Historický prehľad. Bunkové základy neoplázie. Onkogénne RNA vírusy. Onkogénne DNA vírusy.

5. Neobalené DNA vírusy (adeno-, papiloma-, polyoma-, parvo- a cirkovírusy).

6. Obalené DNA vírusy (herpes-, asfar- a poxvírusy).

7. Neobalené RNA vírusy s ikozaédrovou symetriou (pikorna-, kalici-, astro-, reo- a birnavírusy).

8. Obalené RNA vírusy s ikozaédrovou symetriou (toga-, flavi-, borna- a arterivírusy).

9. Obalené RNA vírusy s helikálnou symetriou (ortomyxo-, paramyxo-, rhabdo-, korona-, arena- a bunyavírusy).

10. Vírusy prítomné v potravinách – pôvodcovia alimentárnych nákaz.

11. Charakteristika vlastností arbovírusov – vírusov prenášaných vektormi.

12.-13. Prióny – agensy transmisívnej spongiformnej encefalopatie.

Osnova cvičení (2 hod.)

1. Charakteristika virologického laboratória: biologická bezpečnosť, príprava materiálu, sterilizácia a dekontaminačné postupy.

2. Príprava, pasáž a udržiavanie bunkových kultúr (trypsinizácia buniek, farbenie trypánová modrá, určenie životnosti buniek).

3. Odber vzoriek na virologické vyšetrenie. Transport a uchovávanie vzoriek. Príprava inokula na izoláciu vírusov (nosné výtery, trus, tkanivá). Izolácia vírusov v bunkovej kultúre.

4. Metódy virologickej diagnostiky, charakteristika a rozdelenie.

5. Kvantifikácia vírusov – titrácia vírusov a výpočet TCID50 podľa (Reeda-Muencha a Kärbera); plakformačný test a výpočet PFU.

6. Detekcia antigénov a špecifických protilátok pomocou erytrocytov (Hemaglutinačný test, Hemaglutinačno-inhibičný test).

7. Detekcia špecifických protilátok na bunkových líniách (vírus neutralizačný test).

8. Detekcia vírusových antigénov imunofluorescenčnou technikou.

9. Detekcia vírusových antigénov imunochemickou technikou.

10. Detekcia vírusových antigénov – imunoenzymatická technika (ELISA).

11. Molekulovo-biologické metódy pri diagnostike vírusov – PCR, RT PCR, real-time PCR, in situ hybridizácia.

12. Využitie prietokovej cytometrie pri diagnostike vírusov.

13. Zápočet

Okruhy otázok –Rozsah a obsah študijného materiálu pre absolvovanie skúšky je daný obsahom prednášok uvedených v osnove prednášok.

• Smola J. a kol.: Klinická mikrobiológia, VFU Brno, 2006, ISBN 80-86895-03-3. Holoda, E., Pistl, J., Pilipčinec, E.: Všeobecná mikrobiológia a genetika mikroorganizmov. Vienala, Košice, ISBN 80-88985-62-5, 2001.

• Rajčáni J., Čiampor F.: Lekárska virológia, Veda Bratislava, 2006. Mistríková J., Žemla J.: Taxonómia vírusov stavovcov. UK Bratislava, 2008. • Dorko E., Baranová Z., Dubinský P., Pistl J. a kolektív: Bakteriálne, vírusové, parazitárne a mykotické zoonózy. Equilibria, Košice, 2009, 367 s., ISBN: 978-80-89284-32-0.

• MacLachlan N. J. and Dubovi E. J.: Fenner´s Veterinary virology, fourth edition. Elsevier Inc., 2011, ISBN 978-0-12-375158-4, (angl.) – v študovni.

• Acha P.N. a Szyfres B.: Zoonoses vol. II. Chlamydioses, Rickettsioses and Viroses. WHO. 2003, ISBN 92-75-11992-9.

• Pistl, J. a kol.: Veterinárna virológia. Košice, 2013.

• Prednášky – aktuálne témy.

Obsahová prerekvizita:

• Podmieňujúce predmety: chémia, histológia a embryológia, biochémia, genetika, fyziológia, mikrobiológia;

• Podmienkou pre pristúpenie ku skúške z aplikovanej virológie je úspešné absolvovanie skúšky z mikrobiológie.

Priebežné hodnotenie:

Vypracovanie protokolov laboratórnych vyšetrení

Podmienky na absolvovanie predmetu:

Pre absolvovanie predmetu je nutná 100% aktívna účasť a vypracovanie laboratórnych protokolov. Predmet sa končí písomnou skúškou.

Záverečné hodnotenie:

zápočet, písomná skúška (hodnotenie: 51-100%)

Predmet sa vyučuje v letnom semestri. Minimálny počet študentov pre otvorenie predmetu je 3 a maximálny 12